Karanteenipatogeenien leviäminen muodostaa merkittävän riskin maailmanlaajuiselle kasvinviljelylle, uhkaa viljelykasvien terveyttä ja häiritsee agroekosysteemejä. Oikea-aikainen ja tarkka havaitseminen-sivustolla on ratkaisevan tärkeää tautipesäkkeiden estämisessä. Rekombinaasipolymeraasin monistus (RPA) ja monikomponenttinen DNAzyme (MNAzyme) ovat lupaavia isotermisiä havaitsemistekniikoita; niiden integroitumista on kuitenkin estänyt yksijuosteisen DNA:n (ssDNA) vaatimus MNAzyme-aktivaatiota varten, koska RPA tuottaa kaksijuosteista DNA:ta (dsDNA). Tämän korjaamiseksi kehitimme OAR-MNA-biosensorin, innovatiivisen yhden-potin alustan, joka yhdistää epäsymmetrisen RPA:n (aRPA) MNAzyme{8}}avusteiseen kohdekierrätykseen. Biosensoria käytettiin havaitsemaan Acidovorax citrulli, bakteerihedelmäpilkku (BFB) aiheuttaja kurpitsoissa. Säätämällä RPA-alukepitoisuuksia aRPA tuottaa runsaasti ssDNA:ta, mikä mahdollistaa A. citrullin visuaalisen havaitsemisen havaitsemisrajalla 20 kopiota/μl ja täydellisellä spesifisyydellä, joka ylittää fluoresoivan RPA:n suorituskyvyn. Biosensori osoitti 100 %:n yhteensopivuutta qPCR:n kanssa siemennäytteissä ja säilytti vankan suorituskyvyn piikkimelonihomogenaatissa. Vertaileva analyysimme paljasti OAR-MNA-järjestelmän edut, mukaan lukien pienemmät tunnistuskustannukset ja parannettu kenttäkäytettävyys. Yhdistettynä kannettavaan DNA-analysaattoriin biosensori tarjoaa käyttäjäystävällisiä tuloksia (+/−), joten se on ihanteellinen paikan päällä käytettäviksi. BFB:n lisäksi
havaitseminen, OAR{0}}MNA:ta on sovellettu menestyksekkäästi kurkkuvihreän mosaiikkiviruksen (CGMMV) havaitsemiseen. Se on RNA-karanteenipatogeeni, joka aiheuttaa vakavia menetyksiä kurpitsan sadontuotantoon. OAR-MNA-biosensori mahdollistaa varhaisen ja tarkan diagnosoinnin paikan päällä, ja se edustaa edistystä kasvipatogeenien havaitsemistekniikassa ja tarjoaa lupaavan työkalun maailmanlaajuisen sadontuotannon turvaamiseen.
