Tässä pakkauksessa hyödynnetään isotermistä nukleiinihapon nopeaa monistustekniikkaa. Vakiolämpötilassa (tyypillisesti 39–42 astetta) apuproteiinit ja yksijuosteiset sitovat proteiinit helpottavat kompleksin muodostumista rekombinaasin ja alukkeiden välillä. Kompleksi etsii sitten ja sitoutuu kohde -homologia -alueeseen. Tämä sitoutuminen muodostaa d-silmukan alueen homologisessa paikassa, aloittaen Strand Exchange. Kun rekombinaasi dissosiaatio, polymeraasi sitoutuu alukkeen 3' -päähän, aloittaen ketjun jatke. Hyödyntämällä NFO -entsyymiaktiivisuutta otetaan huomioon spesifinen molekyylikoetteri, ja lopputuloksen havaitsemiseksi käytetään kolloidista kultatekniikkaa (Sandwich -menetelmää).
【Piirteet】
Spesifisyys
Tarjoaa poikkeuksellisen herkkyyden ja spesifisyyden nukleiinihappojen havaitsemiseksi.
Nopeasti
Reaktioaika on vain 15 minuuttia, mikä tarjoaa nopeita tuloksia.
Kätevä
Reaktiokomponentit ovat kuivajauhemuodossa, mikä tekee niistä helppoa käyttää ja varastoida.
Yksinkertainen
Käytetään metallihauteilla, vesihauteilla tai muilla peruslaitteilla, mikä eliminoi kalliiden PCR -vahvistimien tarpeen.
【Pohjamaalesuunnittelu】
Alukkeita on suositeltavaa käyttää 30–35 nt. Lyhyemmät alukkeet voivat vähentää vahvistusnopeutta ja havaitsemisherkkyyttä. Alavirran alukkeella tulisi olla modifikaatioryhmä (yleisesti biotiini) 5' -lopussa. PRIMER -suunnittelun tulisi välttää sekundaarirakenteita, jotka voivat estää monistumista. Suositeltu amplikonin pituus on 150–500 nt.
【Kolloidinen kultakoettimen suunnittelu】
Kohdefragmentin täydentävän koettimen sekvenssin tulisi olla 46–52 NT, joka on suunniteltu ylä- ja alavirran alukkeiden väliin.
- Antigeenimarkkeri (tyypillisesti FAM) on kiinnitetty 5' -päähän.
- A dspacer(Tetrahydrofuraani, THF) on merkitty koettimen keskellä, 5 'ja 3': n välissä, NFO: n tunnistuspaikkana.
- Modifikaatioryhmä, kuten amiini, fosfaatti tai C 3- välikappale, on merkitty 3 ': n päässä.
【Pakkauskoostumus】
|
Compelointi |
Conteltava |
|
ADpuskuri |
1,6 ml × 1tube |
|
B -puskuri |
150 μl × 1tube |
|
POsitiivisen ohjausmalli -- iV |
100 μl × 1tube |
|
POsitiivinen ohjauskoetteri ja pohjamaali mix-iV |
70 μl × 1tube |
|
Reagenssis |
48T |
【Pakkausvaatimukset】
- Tekniset tiedot: 48 t/pakkaus
【KIT -tallennus】
- Säilytysolosuhteet: Säilytä alle tai yhtä suuret kuin -20 ºC vakiona lämpötilaympäristössä. Pidä poissa valosta ja vältä raskasta painetta.
- Säilyvyys: 14 kuukautta.
【Huomautus】
- Itsensä suunnitellut alukkeet/koettimet on lisättävä MIRA-projektin kehittämiseen.
- Pakkausta on saatavana kahdessa tyypissä - DNA ja RNA. RNA -tyyppi sisältää käänteistranskriptaasin, joka mahdollistaa monistumisen RNA: n, dsDNA: n ja ssDNA: n kanssa templaatteina. DNA -tyyppi voi monistaa vain dsDNA: n kanssa templaattina.
- Saatavana kolme tyyppiä - perus-, fluoresoivia ja testiaina. Valitse sopiva pakkaus tarpeidesi perusteella ja käytä vastaavia alukkeita/koettimia.
Suositut Tagit: Mira -DNA -isoterminen nopea amplifiointipakkaus Nukleiinihappokoe -nauha, Kiinan Mira DNA -isoterminen nopea amplifiointipakkaus Nukleiinihappokoe -kaistaleiden valmistajat, toimittajat
