Tässä pakkauksessa käytetään isotermistä nukleiinihappo -monistustekniikkaa, joka toimii huoneenlämpötilassa ja vakiona lämpötila -alueella (tyypillisesti 39 astetta –42 astetta). Prosessi alkaa käänteistranskriptaasilla, joka syntetisoi komplementaarista DNA: ta (cDNA) RNA -templaatteista käyttämällä spesifisiä alukkeita. Rekombinaasin ja alukkeiden muodostama kompleksi, apuproteiinien ja yksijuosteisten sitoutumisproteiinien avustavat, etsii ja sitoutuu kohde-homologiadomeeniin. Tämä johtaa D-silmukan alueen muodostumiseen homologisessa paikassa, aloittamalla Strand Exchange. Kun rekombinaasi on dissosiaatio, polymeraasi sitoutuu alukkeen 3' -päähän, aloittaen ketjun jatkeen. Pakkauksessa käytetään myös eksonukleaasiaktiivisuutta ja spesifisiä molekyylikoettimia monistusprosessin reaaliaikaiseen seurantaan fluoresenssin havaitsemislaitteiden avulla.
【Piirteet】
Korkea herkkyys
Suunniteltu tarkkaan RNA -monistukseen varmistaen tarkan havaitsemisen.
Nopeasti
Reaktio valmistuu vain 20 minuutissa tarjoamalla nopeaa vahvistusta.
Vakaa
Kuiva jauhemuoto yksinkertaistaa käsittelyä ja varastointia.
Yhteensopivuus
Yhteensopiva fluoresenssin kvantitatiivisten PCR -instrumenttien, vakiolämpötilan fluoresenssivahvistimien ja muiden fluoresenssin havaitsemislaitteiden kanssa.
【Pohjamaalesuunnittelu】
Optimaalisen suorituskyvyn saavuttamiseksi alukkeiden tulisi olla 30–35 bp. Lyhyemmät alukkeet voivat vaikuttaa monistusnopeuteen ja herkkyyteen. Alukkeet on suunniteltu välttämään sekundaarirakenteita, jotka voivat estää vahvistusprosessia. Suositeltu amplikonin pituus on välillä 150–500 bp.
【Fluoresoiva koettimen suunnittelu】
Koettimen sekvenssi ei ole päällekkäin tietyn alueen tunnistuskohdan kanssa, pituus on 46-52 nt, ja sekvenssi välttää palindromisen sekvenssin, sisäisen toissijaisen rakenteen ja jatkuvien toistuvien emäksen. Siellä on neljä modifikaatiokohtaa koettimessa: DSPACER (tetrahydrofuran, thf), joka on merkitty 30-35 nt: stä. Exonukleaasin tunnistuspaikka; Fluoresoiva ryhmä on merkitty ylävirtaan THF -paikasta, sammutusryhmä on merkitty alavirtaan ja kahden ryhmän välinen etäisyys on 2-4 nt; THF on noin 15 nt: n päässä 3'päästä, ja 3 '-päätä on merkitty estoryhmällä, kuten amiiniryhmä, fosfaattiryhmä tai c 3- välikappale.
【Pakkauskoostumus】
|
Compelointi |
Conteltava |
|
Puskuri |
1,6 ml × 1tube |
|
B -puskuri |
150 μl × 1tube |
|
Reagenssi |
48T |
|
Opaskäsikirja |
1 kopio |
Huomaa:Kun otetaan huomioon nukleiinihappojen hajoamisen ongelmat, RNA -sarjan tuotteet eivät tarjoa positiivisia kontrollimalleja ja alukkeet.
【Pakkausvaatimukset】
- Tekniset tiedot: 48 t/pakkaus
【KIT -tallennus】
- Säilytysolosuhteet: Säilytä alle tai yhtä suuret kuin -20 ºC vakiona lämpötilaympäristössä. Pidä poissa valosta ja vältä raskasta painetta.
- Säilyvyys: 14 kuukautta.
【Huomautus】
- Itsensä suunnitellut alukkeet/koettimet on lisättävä MIRA-projektin kehittämiseen.
- Pakkausta on saatavana kahdessa tyypissä - DNA ja RNA. RNA -tyyppi sisältää käänteistranskriptaasin, joka mahdollistaa monistumisen RNA: n, dsDNA: n ja ssDNA: n kanssa templaatteina. DNA -tyyppi voi monistaa vain dsDNA: n kanssa templaattina.
- Saatavana kolme tyyppiä - perus-, fluoresoivia ja testiaina. Valitse sopiva pakkaus tarpeidesi perusteella ja käytä vastaavia alukkeita/koettimia.
Suositut Tagit: Mira -RNA -isoterminen nopea monistuspakkausfluoresenssi -II, Kiinan Mira RNA -isoterminen nopea monistuspakkaus fluoresenssi -II Valmistajat, toimittajat
